用于制备组织样品的选择方法可能会导致癌症患者生存率分析的结果产生偏差。为了进行显微镜分析,与保留组织的打孔活组织检查相比,完整的组织样本可更好地显示肿瘤中的免疫细胞活性。由维也纳医科大学内脏外科医生Elisabeth S. Gruber和分子病理学家Lukas Kenner领导的团队通过对直肠癌患者肿瘤组织的免疫组织化学研究证明了这些发现。使用第二种方法,可能会低估肿瘤中免疫细胞的密度,这会导致生存预后出现偏差。该研究已发表在顶级期刊《癌症》上。
为了对组织样品进行显微镜分析,必须准备石蜡切片。为此,将组织样品保存随后脱水并嵌在石蜡块中。此外,样品的薄组织部分被生产并应用于玻璃幻灯片。通常,将每个患者的整个外科手术标本的组织切片涂在一张玻片上,以便可以对肿瘤切片的整个范围进行分析。
为了快速,高效地对多位患者的肿瘤进行显微镜分析,将一小块石蜡肿瘤组织编辑到一张载玻片上。这种所谓的组织微阵列(TMA)是一种组织保留程序,可将昂贵的免疫组织化学分析的成本降至最低。两种方法都可以对肿瘤中的特定蛋白质分子进行染色。组织载玻片的数字扫描可以量化染色的蛋白质分子,并通过使用特殊软件将它们分配到特定的肿瘤区室。
作为这种免疫组织化学研究的一部分,Elisabeth S. Gruber和Lukas Kenner作为重要参与者检查了T细胞在组织样本75名患者进行直肠癌手术后在肿瘤免疫检测中的数量。一组患者在手术前接受了放疗,另一组则没有。最初步的研究假设是放射治疗能调节肿瘤免疫细胞渗透。在直肠癌中,肿瘤中存在的T细胞的密度对于患者的生存至关重要。在这里,分析所使用的的特殊软件是维也纳公司TissueGnostics合作开发的软件,该软件可以分析虚拟建立的组织微阵列(TMA)。
通过比较这两种方法,研究作者Gruber和Kenner证明了T 细胞在肿瘤组织中的分布是异质的,因此使用小的肿瘤样本可能会低估T 细胞的分布。研究结论是,对直肠癌生存预后肿瘤免疫细胞密度的评估最好,最可靠地在肿瘤组织一定最小面积的基础上进行。